Un macho normal que trae una translocación equilibrada produce tanto espermatozoos normales y las células de esperma en las que la translocación da lugar a la no-disyunción de los cromosomas homólogos causando una producción de células de espermatozoos con desviación en el número de cromosomas
Figura 10.9 muestra los histogramas del flujo citometría de células de esperma a partir de dos verracos. Un histograma representa la intensidad de la fluorescencia, que es proporcional al ADN contenido en cada espermatozoide. Cada histograma contiene una intensidad de alrededor de 3000 células de esperma. El cerdo a la derecha (Número 1130) es normal. Produce células de esperma con un Y y un cromosoma X con una proporción de 1:1. Un espermatozoo que contiene un cromosoma Y tiene alrededor de 4 porciento menos de ADN que una célula de esperma que contiene un cromosoma X. Esto se refleja en el hecho de que el valor medio de dos distribuciones difiere con 4 unidades en por ciento.
El cerdo a la izquierda (N º 1523) lleva una translocación entre los
cromosomas 1 y 17. Cuándo
los espermatozoos se forman en este cerdo, algunos errores con respecto a
los dos cromosomas,
translocados. El cromosoma 1 es muy grande, lo que representa alrededor de 9
porciento del contenido de ADN de la célula del esperma. Por lo tanto, el
histograma de este cerdo tiene dos cimas más, una a cada lado.
La cima pequeña a la derecha corresponde
a las células de esperma con dos cromosomas 1, mientras que la parte de la izquierda corresponde a las células con ninguna cromosoma 1.
Las dos cimas extra sólo aparecen cuando son acompañados por un cromosoma X o
Y, respectivamente. Un cromosoma adicional 17, o la falta de uno no son directamente visibles. Este cromosoma es
uno pequeño que contiene aproximadamente el 2 porciento del contenido de ADN de una célula de esperma. Por lo tanto la no-disyunción
de este cromosoma sólo se suma a la variación global de las dos principales
distribuciones. También es evidente que el cerdo con translocación contiene más variación
que el normal.
Las investigaciones son publicados por Jensen, P.O. et al. 1993. Proceedings of 10th European Colloquium on
Cytogenetics of Domestic Animals pp 104-108.
| Figura 10.9. El flujo citometrico de espermatozos cerdo pre manchado con DAPI. El cerdo normal a la derecha tiene dos cimas, una para X y otro Y de las células se carga. El cerdo con una translocación muestra cimas extra debido a los errores durante la meiosis (no disyunción). |
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Naturalmente, el interés en la utilización de la citometría de flujo en un modo de preparativo es grande. Lo que significa que la producción de espermatozoos o bien la realización de cromosomas Y o X. Todas las especies de mamíferos tienen alguna diferencia en el contenido de ADN, respectivamente, en los espermatozoos Y y X (ambos igualmente grande), del 4 al 5 porciento. Técnicamente es factible trabajar con un coeficiente de variación (CV) en torno al 1 porciento, que es el caso en el ejemplo anterior del cerdo normal.
Hasta el año 2010, los resultados, con respecto a los descendientes vivos después de conseguir inseminación con semen sexuado son tan buenos, que se usan en una escala comercial para bovina A.I. y produciendo unos 90 porciento del sexo deseado.
Sondas del cromosoma específicas de ADN para identificar la no-disyunción en las células de esperma
Otro método de identificación de errores de no-disyunción cromosómica es la utilización de de las sondas fuertes específicas de un cromosoma. Después de la hibridación in situ de la sonda en las objetivo con las células de esperma fijo, se puede contar el número de señales en cada celda. El posible resultado es que las células de esperma con 0,1 (normal) o 2 de los cromosomas en cuestión, en función del número de las señales de hibridación positiva. Las investigaciones de este tipo en los seres humanos no dan una tasa media de separación por cromosoma en células del esperma del 0,2 a 0,3 porciento, lo que equivale a un total de 5 a 8 porciento de no-disyunción por espermatozoides. Si de tasa de error en la femenina es de la misma magnitud, la tasa de fecundidad total máxima será de alrededor del 85 porciento, Y ya que casi todos los gametos desequilibrados morirían en el primer trimestre de la vida fetal.